Xây dựng và thẩm định phương pháp UV-Vis và HPLCUV định lượng pregabalin trong hệ niosome

Tóm tắt

Đặt vấn đề: Niosome chứa pregabalin được phát triển nhằm tăng cường phân phối thuốc trong điều trị đau thần kinh. Để bảo đảm chất lượng chế phẩm, cần xây dựng phương pháp định lượng pregabalin chính xác và thích hợp với nền mẫu phức tạp. Mục tiêu: Xây dựng và thẩm định định lượng pregabalin trong hệ niosome bằng hai phương pháp: (1) quang phổ UV-Vis và (2) HPLC-UV. Phương pháp: Thực hiện theo ICH Q2; phương pháp UV-Vis dựa trên phản ứng pregabalin-ninhydrin (90°C/5 phút, 568 nm, tuyến tính 1 - 30 µg/mL). Phương pháp HPLC-UV dùng cột C18, pha động acetonitrile-nước 5:95, phát hiện 205 nm, tuyến tính 0.2 - 2.0 mg/mL; thẩm định các tiêu chí đặc hiệu, tuyến tính, độ đúng và độ chính xác. Kết quả: Phương pháp UV-Vis đạt tuyến tính 1 - 30 µg/mL (R² = 0.9962), LOD 2.42 µg/mL, LOQ 7.34 µg/mL, độ phục hồi 98.82 - 101.28%, RSD < 2%. Phương pháp HPLC-UV tuyến tính 0.2 - 2.0 mg/mL (R² = 0.9993), LOD 42.4 µg/mL, LOQ 128.5 µg/mL, độ phục hồi 98.7 - 101.0%. Kết luận: Cả hai phương pháp đều đạt yêu cầu thẩm định theo ICH Q2 (R1). Trong đó, phương pháp UV-Vis phù hợp cho phân tích nhanh ở nồng độ thấp, còn HPLC-UV thích hợp hơn để định lượng pregabalin chính xác trong nền niosome phức tạp.

Abstract

Background: Niosomes containing pregabalin have been developed to enhance drug delivery in the treatment of neuropathic pain. To ensure product quality, an accurate quantification method suitable for the complex matrix of niosomal formulations is required. Objective: To develop and validate two analytical methods for determining pregabalin in niosomes: (1) UV-Vis spectrophotometry and (2) HPLC-UV. Methods: Method development and validation were performed according to ICH Q2. The UV-Vis method is based on the pregabalin-ninhydrin reaction (90°C for 5 minutes, detection at 568 nm, linearity 1 - 30 µg/mL). The HPLC-UV method employed a C18 column with an acetonitrile-water mobile phase (5:95, v/v), detection at 205 nm, and a linearity range of 0.2 - 2.0 mg/mL. Validation parameters included specificity, linearity, accuracy, and precision. Results: The UV-Vis method exhibited good linearity over the concentration range of 1 - 30 µg/mL (R² = 0.9962), with LOD = 2.42 µg/mL and LOQ = 7.34 µg/mL. Recovery ranged from 98.82% to 101.28%, with RSD < 2%. The HPLC-UV method demonstrated excellent linearity in the range of 0.2 - 2.0 mg/mL (R² = 0.9993), ), with LOD = 42.4 µg/mL and LOQ = 128.5 µg/mL, with recovery values between 98.7% and 101.0%. Conclusion: Both methods successfully met ICH validation standards. Specifically, the UV-Vis method is preferred for rapid analysis of low-concentration samples, while HPLC-UV is more appropriate for the accurate quantification in complex niosome matrices due to its superior specificity.